公司新闻 当前位置:首页 > 新闻频道 > 公司新闻

怎么鉴别猪O型口蹄疫?

猪O型口蹄疫病毒感抄染猪的潜伏期一般为2~3天,发病快的为1天,慢者为14天。病猪先发热,食欲不振,精力沉郁,依墙呆立,蜷袭腿而卧,不肯走动,跛行。蹄部有水疱性病损。开始蹄冠部皮肤发 白,呈现水疱,然后敏捷扩展2113到蹄后部的球节处,继而延伸到蹄叉,发作水疱之处表现为深红色斑块。因为炎症在蹄的皮基部延伸,常使5261角质和基部别离,脱匣。此刻病猪常常躺卧或跪行,膝 盖、飞节等处会有显着外伤。此外,口腔、舌面和上腭常呈现豌豆大的水4102疱,有时数目较多,决裂后上皮层变成微白色碎片而掉落。唇内侧有时呈现1653水疱,继而构成烂斑。鼻镜部也可发作多个 水疱。


口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus, FMDV抗体检O型口蹄疫病毒抗体,用于评估口蹄疫苗免疫状况。

ELISA法,在酶标板条微孔上预包被口蹄疫病毒抗原。在试验中,加入稀释后的待检血清VP1单抗,样本中的抗体阻断了单抗与包被板上抗原的结合;经洗涤除去未结合的酶结合物;在微孔中加入TMB底物液,经酶催化产生的蓝色信号与样本中的抗体含量成反比,加入终止液终止反应后,用酶标仪450nm波长测定反应孔中的吸光度A值。


组份

1

1/2块

6

6/11ml

2

11/22ml

7

1/2ml

3

50/100ml

8

0.5ml/1ml

4

11/22ml

9

2/4张

5

100ml

10

1份

自备的设备及试剂

微量移液器:μμμμ2. 一次性移液器吸头。

量筒:4. 96孔板酶标仪。

6. 洗瓶或洗板机。


样品制备

洗涤液的准备

10倍稀释。稀释好的洗涤液可在4℃存放一周左右。


注意事项

,应将试剂盒各组份放置室温至少

3. 底物和终止液对皮肤和眼可能有刺激性,使用时应该注意防护。

5. 检测板拆封后应(未用完的抗原包被板加干燥剂放于自封袋中,并尽快置于2-8℃6. 所有废弃物在丢弃之前应合理处理以免污染。

8. 抗原包被板为一次性用品,不得重复使用;


操作步骤

每次试验均设置阳性对照2. 将样品稀释液按/孔加入到微孔反应板内,之后将待检样品血清按/孔加入孔内并吹打混匀(移液器枪头请勿混用);

盖上封板膜(可按实际需要自行裁剪),置4. 250ul,后甩去孔内液体,以上步骤重复4-6次,*在干净吸水纸上拍干。

每孔加酶结合物1. 4-6次, 方法同4。切记*在干净吸水纸上拍干。

每孔加显色液μ3. 50μl,使反应终止,10分钟内测定结果。


结果判定

作参比波长)读取吸光度试验

(N)OD值>0.5,同时阳性对照(P)阻断率>50%;

PI (阻断率)=  1 —(样品OD值 ÷ 阴性OD均值)

牛、羊样本

PI≤45%则判断为阴性。


PI(阻断率)>35%则判断为阳性;

贮存方法 2 - 8oC下贮存。