在ELISA试验测定方法中有不少因素影响，其实际操作流程还是要遵循相应的技术规范和要求。除正常反应之外，中海在检查核验中还常常见到出现假阳性或假阴性结果问题。

ELISA试验不成功的四个关键要点：

ELISA实验失败关键要点❶标本自身的影响:

溶血标本和混有红细胞的血清经ELISA法试验检测易产生假阳性。可能是红细胞中的血红素或溶血血清中包含过氧化物酶的红蛋清，在清洗过程中通常不容易完全洗干净。它能使过氧化氢释放原始氧，从而催化底物四甲基联苯胺生成可溶性有色物质，即变成蓝色，产生假阳性。造成严重溶血标本禁用。

ELISA试验不成功关键要点❷标本被*病毒感染:

因为*病毒或许包含内源性辣根过氧化物酶，被*感染的样品与溶血样品一致，或许产生非特异性显色，势必会影响ELISA实验测定方法*终结果。

ELISA实验失败关键要点❸标本储藏保管不合理:

标本在冰箱中放置时长太久，会造成间接ELISA测定本底过深，产生假阳性。为了更好地克服上述影响，ELISA试剂盒测定方法的血清样品应新鲜采集。如无法马上测定方法，可将五日内测定方法的血清样品储存在四摄氏度，七天过后测定方法的血清样品应较低温度冷藏。冷冻储藏和解除冻结的标本，造成鸡蛋白质部分集中化，不均匀分布，应充分融合后进行测量。此时应当轻轻地融合，无需明显振荡。

ELISA试验不成功关键要点❹标本凝结并不充分:

日常工作，偶而为了更好地赢得快速检测的时长，通常在血液进行凝结前，利用强制离心分离血清，使一部分纤维蛋白原残留在血清中，中海ELISA测定方法时可产生看得见的纤维蛋白块，易于产生假阳性*终结果。于是采集后应当使血样充分凝结，接着进行血清分离。