酶联免疫吸附测定试剂盒是酶免疫测定中广泛应用的技术。基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固体载体表面，使酶标记的抗原和抗体在固体表面反应，并用洗涤法洗涤液相中的游离成分。通常使用ELISA酶联免疫吸附试验（ELISA）。有两种方法：双抗体夹心法和间接法。前者用于检测大分子抗原，后者用于检测特异性抗体。
基本原理酶联免疫吸附试剂盒法的基本原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合。这种组合不会改变抗体的免疫特性，也不会影响酶的生物活性。酶标记的抗体可以与吸附在固体载体上的抗原或抗体特异性结合。滴下底物溶液后，底物可以在酶的作用下将其氢供体从无色还原型变为有色氧化型，从而发生显色反应。因此，相应的免疫反应可以通过底物的颜色反应来确定。显色反应的深度与样品中相应抗体或抗原的量成比例。这种显色反应可以通过酶联免疫吸附法定量测定，该法结合了酶联化学反应的敏感性和抗原抗体反应的特异性，使酶联免疫检测法成为一种特异、灵敏的检测方法。
ELISA试剂盒操作步骤
1.确定本试验所需的涂有抗体的酶标记板孔的数量。
2.将0.1ml多重稀释的标准品依次加入一排7个孔中，仅加入样品稀释剂的孔作为对照。处理后，每孔加入100ul。
3.盖上酶标记板，在37℃下反应90分钟。
4.反应完成后，用自动洗板机吸收酶标板中的液体；或者抖掉酶标签板上的液体，将其拍在吸水纸上。清洗两次。
5.按每孔0.1ml的顺序加入制备的生物素抗体工作溶液。37℃反应60分钟。
将6.0.01M TBS或0.01M PBS洗涤3次，每次浸泡约1分钟。
7.按每孔0.1ml的顺序加入制备的ABC工作溶液。37℃反应30分钟。
将8.0.01M TBS或0.01M PBS洗涤5次，每次浸泡约1-2分钟。
9.每孔依次加入0.1ml TMB显色工作液，在37℃黑暗中反应。在反应过程中，要经常观察。当标准的前3-4个孔具有明显的蓝色梯度，而最后3-4个孔没有明显差异时，添加0.1ml/孔TMB终止溶液。（颜色反应不应超过30分钟）。
10.用酶标记物测量450nm处的O.D.值。
11.根据样品的吸光度值在坐标上找到相应的浓度。用户还可以使用各种应用程序进行计算。应记住，样品的实际浓度应为×N