1、 夹心法按操作步骤可分为一步法、两步法和三步法。三种方法之间的差异总结如下：
 
2、 ELISA竞争法与夹心法的区别：
竞争性ELISA：
由于缺少两个以上可用于夹心法的位点，小分子抗原或半抗体不能用双抗体夹心法测量，可以使用竞争法。原理是样品中的抗原与一定量的酶标记抗原竞争，并与固体抗体结合。样品中抗原含量越多，与固相结合的酶标记抗原越少，颜色越浅。
优点：适用于小分子抗原，数据重现性高。
缺点：总体敏感性和特异性较差。
夹心ELISA：
检测到的抗原被包裹在两种抗体之间，其中一种抗体将抗原固定在固相载体上，即捕获抗体。另一种是检测抗体，酶标记后可直接用于测定抗原的量；或者在没有标记的情况下，通过酶标记的两种抗体来测量抗原的量。必须仔细选择这两种抗体，以避免交叉反应或竞争同一抗原结合位点。
优点：高度敏感和特异性，抗原不需要预先纯化。
缺点：抗原必须具有两个以上的抗体结合位点。
竞争法和夹心法有相同点：两种方法都用于检测抗原物质。
差异：竞争法用于检测小分子抗原物质。只有一个反应位点，不能用夹心法检测。大分子抗原更适合夹心法（也可以使用竞争法），因为夹心法具有更好的特异性和敏感性。
 
注：不同物质的适用原则可能不同，因此并不是说竞争法的结果必然优于三明治法，三明治法的结果也不一定优于竞争法。我会根据不同的项目推荐不同的方法。
 
3： 即用标准（稀释液体标准）和高浓度单试剂标准（粉末标准）的优缺点
随时可用：
优点：使用更方便。无需额外稀释，即可拆卸立即使用。线性度会更好
缺点：储存时间相对较短，稳定性容易受到储存条件和时间的影响
粉末标准：
优点：储存时间更长，试剂稳定性更好，可根据需要配置所需的标准浓度
缺点：你需要自己稀释线性浓度。操作麻烦，稀释线性容易出现问题