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采取多种措施预防非洲猪瘟变种

在进行环境样本监测或人口普查时,养猪场用户可以使用快速软拭子和多腔病毒采样管进行有效采样和样本混合。
软拭子头有弹性,弹性绒毛拭子易于弯曲以适应猪场的不同异性部位,增加了采样接触面积,比普通纺锤拭子多2-3倍,可以采集更多的目标样本。
多室取样管不同于市场上的传统取样管。其内部结构分别为洗涤室和挤压储存室。清洗室配有多个垂直刮擦片,用于接触和刮擦进入清洗室并旋转的拭子,帮助洗脱和释放绒毛表面的样品。多个挤压袋可容纳多达十个软拭子。释放样品后,将拭子插入洗涤室上部的挤压室中,以挤出弹性植绒拭子吸附的洗脱液,并从间隙返回洗涤室。与传统的采样管相比,拭子样品可以用不到1/5体积的液体充分洗涤,这可以直接将采样溶液中的病原体浓度提高5-6倍。
(2) 病原体检测方法
原则上,参考“农保办[2020]39号”附件“非洲猪瘟病毒流行株和基因缺失株鉴定检测规范”。
对于采集样本的核酸提取,可以选择快灵手动柱提取试剂盒。如果样本量过大,可以使用快灵磁珠提取试剂盒。
扩增时,建议选择快灵ASFV流行株/基因缺失变异株鉴定试剂盒,即P72/MGF/CD2V鉴定试剂盒(以下简称鉴定试剂盒)。为了适应不同客户的不同仪器,快灵识别试剂盒在标准试剂盒的基础上进行了部分优化,仅涉及检测项目。试剂盒的灵敏度、特异性和其他基本功能是一致的,因此客户可以根据不同的需求进行选择。不同试剂盒的特性见表1:
(3) 抗体检测方法:采用间接ELISA、阻断ELISA等方法检测抗体水平。详见GB/T 18648《非洲猪瘟诊断技术》
抗体检测的意义对于急性疾病的爆发,病毒检测(PCR)是最有用的,血清学诊断价值较低,因为大多数受感染的猪在抗体产生之前死亡;非洲猪瘟变异毒株(包括基因缺失毒株、自然变异毒株、天然弱毒株等)的出现,猪感染该型毒株的潜伏期延长,临床表现轻微。感染这类病毒株后,解毒滴度低,间歇性解毒难以早期发现,因此抗体检测的作用凸显。如果你没有接种疫苗,抗体的存在表明你感染了非洲猪瘟病毒。上海快灵非洲猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒(间接法)是用大肠杆菌表达的非洲猪瘟病毒P30蛋白包被的平板。P30蛋白是病毒的主要结构蛋白,在感染早期表达和分泌,可用于感染后免疫反应的早期检测。
ELISA抗体检测原理ELISA试剂盒是根据固相酶联免疫吸附试验设计的。在该测试期间,样品暴露于微板孔中涂布的非传染性非洲猪瘟抗原。非洲猪瘟抗体(如果测试样品中存在)将与酶板上的抗原结合,并清洗以去除其他未结合的成分;然后添加酶标记物以与酶标记板上的抗原-抗体复合物特异性结合;然后洗涤以去除未结合的酶标记物,将TMB底物溶液加入孔中,并与酶反应形成蓝色产物。颜色深度与样品中的特异性抗体含量呈正相关;加入终止溶液终止反应后,产物变黄;用酶标仪在450nm波长下测定每个反应孔的吸光度值,就可以知道样品中是否含有非洲猪瘟抗体。

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