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抗体快速检测卡在猪疫病防控中的应用

在畜牧业生产中,为减少猪病的发生和流行,除加强猪场的隔离消毒,减少环境中的病毒,还必须指定合理的免疫程序,使得猪体内长期保持抵抗猪病强毒攻击的有效抗体,而要了解猪体内的有效抗体水平,就必须开展猪病免疫抗体水平监测。


目前国内对猪病抗体水平检测方法很多,如ELISA检测法、DOT-ELISA检测法和间接血凝法等,这些检测方法虽然具有微量、特异的优点,但需要条件较好、设备齐全的实验室,对操作人员要求专业性高,而且检测程序繁琐,一次检测至少需要6个小时。不适合于缺少仪器设备和专门技术人员的基层兽医站、养猪场的使用。


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近年来,随着胶体金免疫层析技术及生化制备技术的发展,在人医上用胶体金免疫层析法检测血清中各种抗体已成为现实。


目前,“猪病(猪瘟病毒、猪蓝耳病病毒、猪伪狂犬病毒、猪口蹄疫病毒、圆环病毒)抗体快速检测卡”就可以在很短的时间内检测出猪只接种猪病(如猪瘟)疫苗后,猪体是否产生有效抗体、为当前*检测手段。


且该方法操作简便,不需要任何仪器设备及复杂的样品处理,检测一个样品只需10-15min,结果显示直观,重复性好,容易判定,非常适应基层兽医站、兽医门诊和各养猪场开展疫病的监测及区域性疫病普查。


检测卡8.jpg


原理:本试剂采用胶体金免疫层析试验(GICA)原理制成,样本加入到加样孔后与胶体金标记物一起沿层析膜移动,若样本中存在猪瘟病毒抗体则与胶体金标记物及检测线上的抗原结合而显示紫红色,若样本中不存在猪瘟病毒抗体则不产生颜色反应。


检测方法:撕开检测卡铝箔包装袋,取出检测卡,放于平整、洁净的台面上,使用袋内吸管取1滴血清或2滴全血缓慢滴加到加样孔内,再滴加2滴稀释液到加样孔。室温下放置,10-15 分钟判断结果,15 分钟后的显色结果无效。


结果判断:

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1、阴性:在观察孔内,只有对照线区(C)出现一条紫红色线。


2、阳性:在观察孔内,检测线区(T)及对照线区(C)同时出现紫红色线。抗体滴度越高,检测线(T)颜色越深。


3、无效:在观察孔内,对照线区(C)不出现紫红色线。


诊断参考


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1、  如果该猪未接种过猪瘟病毒疫苗:


A. 当被检样品检测线 T 处无明显色带出现,该样本中不含有猪瘟病毒抗体,如果种群健康,则表示没有猪瘟病毒感染,应当及时进行猪瘟病毒疫苗接种。如果出现相应的急性症状,则不能排除有猪瘟病毒感染。


B. 当被检样品检测线 T 处有明显色带出现,则该动物存在猪瘟病毒感染,或既往感染,应进一步验证。


2、 如果该猪已接种过猪瘟病毒疫苗:


A. 当被检样品检测线 T 条带的色泽≥对照卡中 1:32 效价时,说明猪瘟病毒抗体的滴度较高,已达到抵御野毒攻击的保护水平,同时说明感染野毒的可能性较小。


B. 当被检样品检测线T 条带的色泽<对照卡中 1:32 效价时,说明猪瘟病毒抗体效价未达到抵御猪瘟病毒野毒攻击的*保护滴度,存在感染野毒的风险,建议进行疫苗补种。


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鉴于猪病(如猪瘟)抗体快速检测卡具有简便、准确、快速和容易判定的特点,就能为一些基层兽医站和养猪场检测猪病(如猪瘟)抗体提供非常好的条件。


根据我们的实际经验,我们以猪瘟抗体快速检测卡为例说明,在以下几种情况下使用猪病(如猪瘟)抗体快速检测卡,对指导猪病(如猪瘟)免疫和建立适宜的免疫程序,可以收到很好的效果。


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一、可用于检验猪瘟疫苗的质量和确定免疫的最适剂量


如养猪专业户或大型养猪场购买大批量的猪瘟疫苗放在自己场里的冰箱冻结层内,每次*购买同一批号(一般以生产日期定批号)的猪瘟疫苗。可以从中取出一瓶疫苗,选择不同日龄的乳猪,小猪,种猪若干头,分别应用2头份,3头份,4头份,5头份猪瘟疫苗进行免疫接种,免疫15天后采血,用抗体快速检测卡测定抗体滴度,如果各组都能产生抵制猪病强毒攻击的免疫抗体时,则可以从中选择免疫头份少,抗体滴度高作为本批号疫苗*免疫剂量。如果检测的猪瘟抗体达不到强毒攻击的*保护抗体时,则应当检查是否是疫苗本身问题,还是猪群存在有免疫抑制病毒(如圆环病毒)等的干扰。


这时可以采取更换该厂家不同批号的猪瘟疫苗或另选厂家的猪瘟疫苗,再按上述方法进行不同剂量免疫,来确定是否是该批疫苗失效或是免疫抑制病毒的干扰,判定适宜的免疫剂量。


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二、在母猪分娩时使用


当母猪分娩时,用猪瘟抗体快速检测卡检测母猪的抗体水平。


检测结果:如果在试纸条上只出现一条色线(C质控线),说明母猪体内的猪瘟抗体滴度已低于抵抗猪瘟强毒攻击的*保护抗体,母猪应当及时进行猪瘟疫苗接种,同时乳猪应当及时采用超前免疫,以免发生猪瘟病。如果母猪检测出现二条色线,说明体内的猪瘟抗体滴度较高,可以抵抗猪瘟强毒的攻击,就不需要进行超前免疫,因为母猪可以通过初乳把猪瘟抗体垂直带给仔猪。这时仔猪可以按照正常的免疫程序进行预防注射。


三、当无法判断有无猪瘟时使用


当从外地,尤其是从外地区或外省购进大批量的小猪种或种猪时,饲养主自己无法了解购买的小猪是否进行过猪瘟疫苗免疫或者免疫是否有效。为了防止猪瘟病发生,选择什么时间再进行猪瘟免疫最适宜时,则可以根据不同地区,不同日龄的猪只,选择有代表性的猪只采血,应用猪瘟抗体快速检测卡进行快速检测,通过检测结果,可以了解整个猪群猪瘟抗体的状况来决定是否及时开展免疫及选择适宜的免疫剂量,这样可以大大的避免猪瘟病的发生。


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四、在怀疑发生猪瘟病时使用


可以采集病猪血液(血清)用猪瘟抗体快速检测卡检测,如果是发生猪瘟病时,猪体血液中没有猪瘟抗体或抗体滴度很低。当然,发生猪瘟而耐过不死的猪只,抗体滴度可能会很高。


五、在发生猪瘟后使用


进行疫病监测时,可应用抗体快速检测卡进行快速检测。如猪场发生猪瘟病时,常规的处理程序是全面隔离消毒和紧急预防注射。此时猪群特别是种猪场的猪群的抗体滴度差异很大,当紧急预防注射后的抗体滴度水平又会出现明显的差异,因此,还应了解猪群猪瘟抗体水平,制定合理的免疫程序尤为重要。


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