秋冬春季是禽流感的高发季节，定期监测家禽的禽流感抗体滴度，了解禽群免疫状态尤为必要，即使怀疑禽群发生禽流感感染也不要慌张，了解禽流感的送检和诊断操作流程，往往事半功倍。通过检测禽群的疫病情况与否并加以分析，总结案例，才能收获养殖经验。

1、具备什么条件才能采集病料做病原分离？

高致病性禽流感属于一类传染病，为了防止疾病蔓延扩散，其病原分离必须在农业部指定的专业实验室、具备BSL3条件的实验室中进行。在不具备严格防护条件的实验室进行病毒分离增殖，容易引起散毒以及有可能造成实验人员的感染。

2、发生禽流感后如何采集分离病原的样品？

诊断很大程度上依赖于样品的质量、样品在进行实验室处理前的储存和运输过程的情况。用于细胞培养、鸡胚接种、直接检测病毒抗原或核酸的呼吸道病毒的样品，应在流感症状出现的开始3天进行采集。禽流感主要由呼吸道和消化道感染。因此，哺乳动物及禽类上呼吸道采集的样品适合用于流感病毒的鉴定和诊断。上呼吸道拭子分为三种：鼻棉拭子、喉棉拭子和气管棉拭子。已屠宰或已死亡的哺乳动物应在下呼吸道采集样品，样品分为气管棉拭子、支气管棉拭子、肺组织等三种。禽类样品采集的部位应集中在呼吸道和大部分的消化道，采集的病毒样品种类包括泄殖腔棉拭子和粪便，其中泄殖腔棉拭子可从活体鸡或剖杀的鸡群中采集，从鸡舍或环境中采集粪便样品是常用的采样方法，但其具有不能确定样品的准确来源的缺点，如果怀疑死禽体内含有高致病力的禽流感病毒，还应采集有代表性的内脏器官如脑、脾脏、心脏、肺脏、胰腺、肝脏和肾脏以及呼吸道、消化道等部位的标本。标本样品应添加*以防止*的生长。

3、如何采集和运送病理样品？

病理样品一般应在感染初期或发病急性期从死禽或活禽采取。死禽采集气管、肺脏、肝脏、肾脏、脾脏、泄殖腔等组织样品。活禽用大小不等的灭菌棉拭子涂擦喉头、气管或泄殖腔，带有分泌物的棉拭子放入每毫升含有1000国际单位青霉素、2000微克链霉素、pH7.2~7.6的肉汤中，无肉汤时可用Hank，s液或25%~50%的甘油生理盐水。粪便和泄殖腔棉拭子所用*浓度应提高。

样品的运送和保存：采集的样品若在48小时内进行检查，可放入4℃保存；否则应放于低温条件下保存。

4、高致病性禽流感诊断方法和程序是什么？

（1）流行病学禽流感病毒的宿主广泛，鸡、火鸡、鸭、鹅、鹌鹑和雉鸡等家禽及野鸟、水禽、海鸟等均可感染。其中以鸡和火鸡感染禽流感病毒后的危害最为严重，而在鸭中分离到的病毒比其他禽类多。各种日龄的禽均可感染。禽流感病毒主要通过患禽间（包括与患禽接触的器具）的直接接触和间接接触传染。此外，带毒的飞鸟或水禽常常成为传染源，引起家禽大批地发病和死亡。

（2）临床症状禽流感的潜伏期从几小时到3天不等，潜伏期的长短依赖于感染病毒的毒力和剂量、感染途径、被感染禽的种别和禽体的状态。急性感染的禽流感无特定临床症状，在短时间内可见食欲废绝，体温骤升，呼吸道症状，下痢，后期出现神经症状。伴随大量死亡。

（3）病理变化禽流感的病理变化因感染毒株毒力的强弱、病程长短和禽种的不同而变化不一。主要表现为头肿，肉髯、冠出血，小腿和趾部皮下出血、水肿，腺胃乳头出血及输卵管炎等。

（4）病原学诊断 病毒分离需由国家规定实验室完成。

（5）血清学诊断目前用于禽流感检测的方法有禽流感病毒分离技术、琼脂扩散（AGP）试验、血凝抑制（HI）试验、神经氨酸酶抑制（NI）试验、酶联免疫吸附试验（ELISA）、病毒中和试验（SN）、反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）、免疫荧光技术（IF）及核酸探针技术。

总之，对禽流感的诊断，实验室病毒的分离、鉴定，以及致病性试验都耗时较长，花费也较高，只有极少数的实验室能进行此项检查，在收到检查样品后不能在较短时间（48小时）内做出确诊，确诊滞后于现场采取措施的要求。禽流感这类疫病的确诊越快、越早，损失就越小。

5、病原的确认工作大概需要多长时间？做什么实验？

高致病性禽流感必须通过病毒的分离、鉴定来确诊。病毒的分离及亚型鉴定一般至少需要3~5天。病毒的致病性必须通过人工静脉接种无特定病原鸡（SPF鸡）来最后确定。

6、禽流感疫苗免疫后鸡群禽流感抗体需要定期监测么？

禽流感疫苗免疫机体后需要定期的监测禽流感抗体滴度变化，避免免疫空白期的产生，监测鸡群抗体滴度及鸡群个体间抗体整齐度，若鸡群抗体整齐度高，则说明鸡群的免疫状态良好。一般来说，蛋鸡或种鸡开产前至少免疫三次，开产后每三个月左右免疫一次，或者根据抗体监测变化，确定*的免疫时机，让免疫接种发挥*效果。