小反刍兽疫（Peste des Petits Ruminants, PPR）俗称“羊瘟”，是由小反刍兽疫病毒引起的一种急性病毒性传染病，主要感染山羊和绵羊，偶尔感染牛、水牛和骆驼，以发热、口炎、腹泻、肺炎为特征。该病是OIE法定报告动物疫病，也是全球计划根除的动物疫病，我国将其列为一类动物疫病。
1．突然发热，第2~3天体温达40~42 ℃高峰。发热持续3d左右，病羊死亡多集中在发热后期。
2．眼、鼻大量排出分泌物，最初水样的眼、分泌物日益增多变成脓性然后结干，动物发出恶臭。由于鼻孔被凸起的结干的鳞屑覆盖，动物打喷嚏和咳嗽。呼吸急促，呼吸困难，排痰性咳嗽和眼睛的卡他性分泌物。3．口腔粘膜充血，口腔上皮和鼻腔粘膜出现大量部分粘连的极微小的略灰色坏死点，坏死组织脱落后形成界线分明的浅糜烂斑。上皮破损偏好部位为嘴唇、齿龈、牙板、舌头以及母羊阴户的阴唇表面。口腔破损可能伴有大量流涎。4．发热2~3 d后病畜开始腹泻，伴随严重脱水、消瘦、虚脱。怀孕母羊可发生流产。5．特急性病例在发热开始的4~6 d内死亡。亚临床型病例症状较轻，病畜在生病10 ~14d以后康复。1．嘴唇充血，口腔破损程度不等，较轻的只有一处溃疡，严重的出现广泛的溃疡性及坏死性口腔炎，涉及牙板、硬腭、颊粘膜、乳突和舌头喙部背面。粘膜病变可延伸至咽部，偶尔在网胃和瘤胃交界处。2．上呼吸道粘膜可能严重充血，伴有鼻孔和气管的溃疡。支气管肺炎，肺尖肺炎。皱胃粘膜出现严重的充血和溃烂。偶尔，整个肠道出现弥散性的充血，但是，多数情况仅局限于十二指肠、回肠、盲肠和结肠上部分。常见回盲肠瓣膜出血。大肠纵向折叠顶部偶尔出现严重的出血形成斑马样条纹。3．肠淋巴组织坏死、萎陷。肠系膜淋巴组织轻微肿大、水肿，脾可能肿胀。上呼吸道粘膜可能严重充血，伴有鼻孔和气管的溃疡。支气管肺炎，肺尖肺炎。肺部淋巴结肿胀并水肿。4．结膜出现脓性结膜炎。肾和膀胱可见充血。母羊可见阴户和阴道糜烂。5．组织学上可见肺部组织出现多核巨细胞以及细胞内嗜酸性包含体。
(1) 选择处于发热期（体温40~41℃）、排出水样眼分泌物、出现口腔溃疡、无腹泻症状的活畜采集样品。采集结膜棉拭子2个、鼻粘膜棉拭子2个、颊部粘膜棉拭子1个。(2) 无菌采集血液10mL，用常规方法分离血清。(3) 选择刚被扑杀或者死亡时间不超过24h的病畜采集组织样品。无菌采集肠系膜和支气管淋巴结各3~4个，脾、胸腺、肠粘膜和肺等组织各约25~50g。处理棉拭子、组织样品或肉制品，接种Vero细胞，在37℃含5%二氧化碳培养箱培养。接种后5d内，细胞应出现细胞病变效应，表现为细胞融合，形成多核体。如接种5~6d后不出现细胞病变，应将细胞培养物盲传三代。将出现细胞病变的细胞培养物，使用RT-PCR 方法和荧光定量 RT-PCR方法做进一步鉴定。样品出现细胞病变，而且RT-PCR方法或实时荧光RT-PCR方法鉴定结果为阳性，则判为小反刍兽疫病毒分离阳性，否则判为阴性。可以采用针对N基因的引物对小反刍兽疫病毒进行核酸检测，引物的靶基因、位置、序列和扩增产物的大小见表4。
针对小反刍兽疫病毒N基因保守序列区段设计引物和探针，引物和探针的位置和序列见表5。表5 用于小反刍兽疫病毒实时荧光定量RT-PCR检测的引物和探针
中间孔加阳性抗血清，周边3个孔加阳性抗原，1个孔加阴性抗原，另2个孔加待检抗原，待检抗原、阴性抗原和阳性抗原交替排列。对流免疫电泳是检测病毒抗原的最快速的方法。水平电泳槽的两个部分由一个桥连接，电泳仪连接到一个高压电源。1%~2%（w/v）琼脂或琼脂糖溶解在0.025M醋酸巴比妥缓冲液中，将凝胶分散在载玻片上，凝胶上打6~9对孔。每对孔加反应物，血清在正极，抗原在负极。将载玻片置于连接桥上，两端由湿滤纸与缓冲液相连接。电泳30~ 60min后，在强光下观察，每对孔间出现1~3条沉淀线的为阳性反应，阴性对照应无反应。免疫捕获ELISA采用几种抗小反刍兽疫病毒N蛋白单克隆抗体作为捕获抗体包被ELISA板，以生物素标记的小反刍兽疫病毒N蛋白单克隆抗体作为检测抗体，以酶标记亲和素为显色剂，检查被检样品中存在的小反刍兽疫病毒；也可采用抗小反刍兽疫病毒多克隆抗体作为捕获抗体包被ELISA板，以酶标记抗小反刍兽疫病毒N蛋白单克隆抗体作为检测抗体和显色剂，检查被检样品中存在的小反刍兽疫病毒。该方法的特异性好，可用于小反刍兽疫和牛瘟的病原学鉴别诊断，还可用于疫苗生产质量的监控。但成本太高。PCR-ELISA通过ELISA，使用标记的探针在一块板上进行检测。小反刍兽疫病毒的PCR-ELISA是种高灵敏度的基于小反刍兽疫病毒N基因的检测方法。这种方法的灵敏度与传统的RT-PCR相比高10倍。临床试验中，比免疫捕获ELISA更适于检测早期感染的病毒。同时能够有效区分小反刍兽疫病毒与牛瘟病毒。
酶联免疫吸附试验包括竞争ELISA、间接ELISA。具有快速、高通量等优点，已逐渐成为小反刍兽疫血清学检测的*方法。竞争ELISA是世界动物卫生组织认可的小反刍兽疫血清学检测试验。竞争ELISA已有商品化试剂盒，一种包被抗原是杆状病毒表达的重组N蛋白，竞争单抗是抗小反刍兽疫病毒N蛋白单抗；还有一种的包被抗原为纯化的全病毒，竞争单抗为抗小反刍兽疫病毒H蛋白单抗。间接ELISA以重组小反刍兽疫N蛋白为检测抗原的间接ELISA试剂盒，和竞争ELISA具有良好的符合率，但不能区分牛瘟病毒和小反刍兽疫病毒产生的抗体。由于我国已消灭牛瘟，间接ELISA适合我国小反刍兽疫流行病学调查。中心孔加抗原，1、3、5孔加标准阳性血清；2、4、6孔加被检血清。每个平皿设一组对照，即1、3、5孔加标准阳性血清，2、4、6孔加阴性血清。加样后静置10min，移入湿盒内于室温（22~25℃）反应。将胶体金标记的SPG（链球菌G蛋白）固定于金标垫，检测线为纯化的PPRV N蛋白,对照线为兔抗SPG。检测时，阳性样品中的抗PPRV抗体与胶体金标记SPG特早性地结合，在NC膜上移动时，被检测线上的PPRV N蛋白捕获，胶体金颗粒聚集于此，形成红色的条带，即检测线。相反，阴性样品中不含抗PPRV抗体，在检测线处不形成红色条带。对照线试剂兔抗SPG与胶体金标记SPG结合，捕获金标复合物，形成对照线。（一）《全国小反刍兽疫消灭计划（2016—2020年）》
免疫动物群体以病原学监测为主，非免疫动物群体以血清学监测为主。对病原学阳性动物及同群动物进行扑杀和无害化处理，并做好追溯排查等防控工作；对血清学阳性的非免疫动物进行扑杀和无害化处理，对同群动物进行全面排查，并隔离观察至少21天，在隔离期内每周开展检测。省级和地市级动物疫病预防控制机构以病原学监测为主，县级动物疫病预防控制机构以血清学监测为主。各地动物卫生监督机构应结合当地小反刍兽疫风险评估状况开展产地检疫。（二）《2019年国家动物疫病监测与流行病学调查计划》——小反刍兽疫监测计划对31个省（自治区、直辖市）和新疆生产建设兵团的山羊、绵羊、野羊于春季（4~5月份）、秋季（10~11月份）各开展一次免疫抗体集中监测，各省制定年度监测方案做好常规监测。抗体检测使用竞争ELISA和阻断ELISA方法。病原检测采集拭子或者组织样品，采用RT-PCR或者实时RT-PCR方法进行检测。
