一、为什么需要检测非洲猪瘟抗体？

答：目前非洲猪瘟在我国处于流行后期，流行毒株由早期的强毒株转变为现在的变异株（基因缺失株，自然变异株、自然弱毒株）。生猪感染变异株后，排毒滴度低，呈间隙排毒，可能检测不到核酸（核酸及抗原检测为阴性），一旦处于应激状态，有排毒风险，但是猪体内已产生抗体，可持续存在。此种情况下辅以抗体检测，有助于更好的对感染非洲猪瘟的猪群进行“拔牙”处理。

二、非洲猪瘟病毒抗体检测卡的用途有哪些及结果如何解读？

答：非洲猪瘟病毒抗体检测卡检测的是非洲猪瘟病毒抗体，适用于猪场对非洲猪瘟的“拔牙“处理（抗原抗体双阴性场地），或者对耐过猪适时的进行监测检测（主要是各种应激环境下是否重新排毒的监测）。需要注意的是，非洲猪瘟病毒抗体检测卡是用作对ASFV核酸检测阴性疑似病例的补充检测指标，或疑似病例诊断中与核酸检测协同使用，并不能作为ASFV感染的确诊和排除的依据。

1、当非洲猪瘟病毒抗体检测试纸卡检测为阳性：

①有临床症状、进一步核酸或抗原检测阳性，感染非洲猪瘟。

③无临床症状、进一步核酸或抗原检测阳性，进行病毒分离，确定感染还是耐受。

2、当非洲猪瘟病毒抗体检测试纸卡检测为阳性：

①无临床症状、进一步核酸或抗原检测阴性，未感染非洲猪瘟。

②有临床症状、进一步核酸或抗原检测阳性，感染非洲猪瘟早期。 

3、当非洲猪瘟病毒抗体检测试纸卡检测结果判定为可疑时（检测线显色非常弱，呈现浅灰色—结合判定参照卡），应结合猪只临床症状综合判定，如无症状7天后复检一次，如颜色无变化，判定阴性，如果颜色加深则判定为阳性。

三、非洲猪瘟病毒抗体检测试纸卡检测抗体是否可以采集口咽拭子进行检测？

答：不可以，目前绝大多数的抗体检测试剂盒也均不能采用口咽拭子进行抗体检测。因为口咽拭子主要获取的是猪只口腔或咽部黏膜表面分泌的粘液，而机体黏膜表面产生的抗体主要是lgA(一种免疫球蛋白)，同时分泌量不高，通过口咽拭子获取的lgA就更加少，目前检测试纸卡还不能达到如此之高的灵敏度。（核酸检测之所以能够通过口咽拭子检测，是因为检测过程进行了核酸的无限次扩增，最后达到了可检测的量。而机体获取的抗体，以目前的技术是无法扩增的。）而机体在感染的情况下在血液中能产生的大量的抗体是lgG，所以对于抗体的检测，采血进行检测是最为有效的方式。

四、采血检测的注意事项有哪些？

答：目前非洲猪瘟病毒抗体检测试纸卡主要样本是血清或血浆，因此通过尾根或者耳静脉采血获得一定量的血液样本应当尽快处理后获得血清或者血浆，避免溶血的发生，获得血清或血浆如果不马上检测，则尽快放在4℃左右环境存储，短期（1-2天）不检测，应置于-20℃以下存储。

五、非洲猪瘟病毒抗体检测试纸卡的准确性如何？

答：非洲猪瘟病毒抗体检测试纸卡在3家省级以上实验室单位（中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、湖北省动物疫病预防控制中心、湖南省动物疫病预防控制中心）做过验证试验（灵敏度、特异性、符合率等），其中灵敏度结果为非洲猪瘟标准阳性血清的稀释1：28仍然能检出；特异性的结果为与其他猪病抗体无交叉反应；在符合率方面，与进口ELISA试剂盒（西班牙INGENASA非洲猪瘟病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒及法国IDVET非洲猪瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒）的符合率均在90%以上。

六、为什么同时采用p30和p72检测抗体？

答：p72和p30是已知的诱导中和抗体（非典型）的主要ASFV抗原，其中p72（p73）蛋白是病毒核衣壳的重要组成部分。产生于病毒感染晚期，占ASFV总蛋白的32%，抗原性保守稳定，对自然感染具有免疫原性。而p30（p32）蛋白在病毒感染早期合成，在感染后4h胞浆内即可检测到，感染后12h减少，与晚期蛋白开始合成相一致，但是新合成的p30在感染晚期每个阶段都能检测到，能够诱导较强的体液免疫应答。同时采用两种蛋白检测抗体相对而言提高了对非洲猪瘟抗体检测的灵敏性和特异性。

七、非洲猪瘟病毒抗体检测试纸卡与ELISA试剂盒检测结果不一致的原因有哪些？

答：1、两种方法包被的抗原可能不一样。如西班牙ELISA试剂盒包被的是p72蛋白，检测的是抗p72的抗体；而非洲猪瘟病毒抗体检测试纸卡中包被的p30+p72蛋白，检测的是抗p30和抗p72抗体，因此两个检测的抗体是不一样的。p30在非瘟病毒感染的早期合成（早于p72），且一直持续整个感染期。所有两者的检测结果有时存在差异。

2、由于两者的原理并不完全一致，ELISA是采用间接法或阻断法测定，试纸卡是双抗原夹心法测定，二者的制备工艺也不一样。另外还有可能存在部分干扰因素对试纸卡和ELISA的影响结果并不完全一致，因为ELISA可以通过每一步的洗板除去部分干扰物质，试纸卡没有此过程，靠样品垫过滤。所以两者的检测结果可能有差异。

干扰物质种类：

①血清样本中内源性干扰物质如嗜异性抗体，补体等。

②血清中外源性干扰物质包括样本溶血、样本被*污染、样本贮存时间过长和样本凝固不全等。