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首页 >> 产品中心 >>动物疫病ELISA试剂盒 >> 布鲁氏杆菌酶联抗体检测试剂盒(酶联免疫法)96T
详细说明

布鲁氏杆菌酶联抗体检测试剂盒(酶联免疫法)96T

 本试剂盒由预包被布鲁氏杆菌提取脂多糖的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成,应用酶联免疫法(ELISA)原理检测牛血清、血浆样本中布鲁氏杆菌抗体。

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商品说明

布鲁氏杆菌酶联抗体检测试剂盒

使用说明书

检测原理

    本试剂盒由预包被布鲁氏杆菌抗原的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成,应用酶联免疫法原理检测血清、血浆样本中布鲁氏杆菌抗体。实验时在酶标板中加入对照血清和待检样本,经温育后若样品中含有布鲁氏杆菌抗体,则将与酶标板上抗原结合,经洗涤除去未结合的其他成分后;再加入酶标记物,与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶标记物,在孔中加TMB底物液,与酶标结合物反应形成蓝色产物,显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关;加入终止液终止反应后,产物变为黄色;用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值,即可知样品是否含有布鲁氏杆菌抗体。

试剂盒组成

序号

名称

规格/96T

1

酶标记物

10ml×1

2

样品稀释液

20ml×1

3

20X浓缩洗涤液

25ml×1

4

显色液A

5ml×1

5

显色液B

5ml×1

6

终止液

10ml×1

7

阳性对照

1.0ml×1

8

阴性对照

1.0ml×1

9

酶标板

96T×1

10

封板膜

1

储存及有效期

2~8℃保存,有效期12个月。

包被板开封后请于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限为2个月。

适用仪器

含450nm波长的酶标仪,37℃恒温设备,可调微量移液器。

样品准备

1.取动物全血按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染。样品1周内可于2~8℃保存,长期需置-20℃保存。

2.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释成工作洗涤液(如19份蒸馏水或去离子水加1份浓缩洗涤液)。

检验方法

1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。

2.取所需用量酶标板条,设阴性、阳性对照各1孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。

3.样品孔先加入10ul待检样品,再加入90ul样品稀释液,充分振荡混匀。

4.阴性、阳性对照孔分别加入阴性、阳性对照100μl。

5.混匀,盖好盖板膜,置37℃温箱孵育30分钟。

6.甩去孔内液体,每孔加250ul工作洗涤液,用震荡混匀的方式洗涤60秒后弃去,重复洗涤5次,*后一次拍干液体。

7.每孔加酶标记物100μl,置37℃避光反应30分钟。

8.甩去孔内液体,每孔加250ul工作洗涤液,用震荡混匀的方式洗涤60秒后弃去,重复洗涤5次,*后一次拍干液体。

9.根据样品数量将显色液A与显色液B按等体积比例混匀配置为底物工作液,现配现用。每孔加100ul,置37℃避光反应10分钟。

10.每孔加终止液100μl,混匀,于450nm测定各孔吸光值(OD值)。

参考值

实验正常的情况下,阳性对照OD-阴性对照OD>0.2。

检验结果的解释

1. S/P=(样品OD-阴性对照OD)/(阳性对照OD-阴性对照OD)。

2. S/P≥0.4时结果判读为阳性。

3. 0.2<S/P<0.4时结果考虑可能存在抗体效价不足或疑似感染。

4. S/P<0.2时结果判读为阴性。

试验方法的局限性

1. 本试剂盒仅作为定性检测样品中布鲁氏杆菌抗体的粗略评估。

2. 本试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验。

注意事项

1.实验操作时需戴手套、穿工作衣,严格健全和执行消毒隔离制度,各种实验废弃物都应按传染物处理。

2.终止液具有腐蚀性,应避免接触皮肤和衣物,如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。

3.酶标板从冷藏环境中取出时应恢复至室温方可开袋,未用完的酶标板需放入有干燥剂的密封袋中保存。

4.浓缩洗涤液在低温时容易结晶,使用时需恢复至室温以完全溶解。

5.用于检测的样品应保持新鲜。

6.试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。

7.底物显色过程中,若有整体显色速度过快的情况,可酌情缩短显色时间,显色时间*长不超过15分钟。

8.不同批号试剂组分不得混用。


赛诺利康生物技术(北京)有限公司


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